Полимеразна верижна реакция, съкратено катоPCRна английски е техника на молекулярна биология, използвана за усилване на специфични ДНК фрагменти.Може да се разглежда като специална репликация на ДНК извън тялото, която може значително да увеличи много малко количество ДНК.По време на цялотоPCRреакционен процес, един клас вещества играе жизненоважна роля – ензимите.
1. Taq ДНК
При експерименти в ранните дни наPCR, учените са използвали ДНК полимераза I на Escherichia coli, но има проблем с този ензим: той трябва да попълва нов ензим всеки път, когато се извършва цикъл, което прави стъпките на операцията леко сложни и е трудно да се усили напълно автоматично.Този проблем беше решен, след като учените случайно изолираха Taq ДНК полимераза от Thermus aquaticus през 1988 г. Оттогава автоматичното усилване на ДНК се превърна в реалност.Откриването на този ензим също правиPCRтехнология удобна, практична и универсална технология.В момента Taq ДНК полимеразата е най-разпространената полимераза в ДНК комплектите.
2. PfuDNA
Както бе споменато по-горе, Taq DNase има голям проблем, така че учените са модифицирали Taq ДНК полимеразата до известна степен, за да избегнат неспецифично усилване поради несъответствие, което води до неточни резултати от теста.Но модификацията на Taq ДНК полимеразата може да инхибира активността на ДНК полимеразата при стайна температура.PfuDNA полимеразата може добре да компенсира горните недостатъци на Taq ДНК полимеразата, така че PCR реакцията да може да се проведе нормално и степента на успех на амплификацията на целевия ген може да бъде ефективно подобрена.
3. Обратна транскриптаза
Обратната транскриптаза е открита през 1970 г. Този ензим използва РНК като матрица, dNTP като субстрат, следва принципа на сдвояване на основите и синтезира единична верига на ДНК, комплементарна на РНК матрицата в посока 5′-3′.Обратната транскриптаза зависи предимно от ДНК полимеразната активност от ДНК или РНК матрици и следователно няма 3'-5' екзонуклеазна активност.Той обаче има активност на РНКаза Н, която ограничава до известна степен дължината на синтеза на обратната транскриптаза.Поради ниската точност и термостабилност на дивата обратна транскриптаза, учените също я модифицираха.
ЗаPCRексперименти, основните консумативи са: индивидуална PCR епруветка, 4/8-лентова PCR епруветка, PCR плаки.
На ЛабиоPCR консумативиимат следнотопредимства:
PCR плаки: Широка съвместимост с термоциклери;Висок контраст, лесна идентификация;добре флуоресцентно отражение; добропренос на топлина;Сертифицирани DNase, RNase, ДНК, PCR инхибитори и тествани без пироген.
Индивидуални епруветки за PCR: Устойчив на изпарение; добърпренос на топлина;отлична оптична яснота; Сертифицирани DNase, RNase, ДНК, PCR инхибитори и тествани без пироген.
4/8-ленти PCR епруветки: Изключително тънки стени; висока яснота; добро флуоресцентно отражение;може да се използва във фармацевтичната промишленост, хранително-вкусовата промишленост и молекулярната биология; висококачествен, чист PP материал; сертифицирани DNase, RNase, DNA, PCR инхибитори и тествани без пироген.
Време на публикуване: 09 юни 2023 г